La journée où le prélèvement d’ovules a lieu, le partenaire doit donner un échantillon de sperme. Le prélèvement du sperme s’effectue après la masturbation dans un collecteur d’urine stérile, dans un espace spécialement conçu du Centre FIV ou à la maison, pourvu que l’échantillon est transporté au laboratoire dans une heure. Normalement, il est recommandé à l’homme l’abstinence de l’éjaculation 3-5 jours avant le prélèvement des ovules.
L’échantillon de sperme est traité dans le laboratoire avant d’être placé avec les ovules pour effectuer la fécondation.
Parfois, pour le traitement est utilisé de sperme cryoconservé ( «congelé») donné précédemment. Tel est le cas de perturbations graves du sperme, qui, pour des raisons de sécurité, à savoir pour éviter qu’il n’y ait pas de spermatozoïdes dans l’échantillon jusqu’au jour du prélèvement d’ovules, le sperme a été cryoconservé à l’avance.